在HIC分離中,采用高鹽緩沖溶液為流動相吸附蛋白。高鹽有助于形成溶致效應(yīng)(lyotropic effect),從而使蛋白質(zhì)結(jié)合到疏水基團(tuán)上,通過降低鹽的濃度來洗脫蛋白。大多數(shù)治療用的目標(biāo)樣品用低鹽或無鹽緩沖液都能洗脫下來。
東曹公司提供5種具有不同疏水性和選擇性的HIC填料。疏水性由弱到強(qiáng)的順序?yàn)椋阂颐眩?/span>Ether),聚丙二醇(PPG),苯基(Phenyl),丁基(Butyl),己基(Hexyl)。Toyopearl Hexyl和Butyl常用來分離低疏水性的蛋白;Toyopearl Ether常用來純化疏水性很強(qiáng)的蛋白質(zhì),比如單克隆抗體和膜蛋白,這兩種蛋白會和其他疏水介質(zhì)結(jié)合的非常牢固而導(dǎo)致低的回收率。若客戶對樣品的疏水性不十分清楚,一般建議客戶先選用中等疏水性的Toyopearl Phenyl做條件的摸索。
產(chǎn)品特點(diǎn)
l? 基材為親水性的聚合物,適用于生物大分子的分離,化學(xué)穩(wěn)定性、熱穩(wěn)定性及剛性良好,易于放大生產(chǎn)及清洗。
l? 蛋白的非特異性吸附低及活性收率高。
l? 孔徑多為1000 ?,該孔徑對于多數(shù)蛋白來說都有很高的有效比表面積,針對單克隆抗體,東曹開發(fā)的750 ?,擁有很高的DBC(動態(tài)載量)。
Toyopearl系列粒徑有三種規(guī)格:C型 100μm 一般應(yīng)用于捕獲階段。
M型 65μm 應(yīng)用于中度純化階段。
S型 35μm? 應(yīng)用于中度純化及精制階段。
產(chǎn)品 | 粒徑(μm) | 孔徑(?) | 吸附載量 (mg ? 溶菌酶/ml填料) | 耐壓(bar) |
Toyopearl Ether-650S | 20-50 | 1000 | 10-30 | 3 |
Toyopearl Ether-650M | 40-90 | 1000 | 10-30 | 3 |
Toyopearl PPG-600M | 40-90 | 750 | 45-55 | 3 |
Toyopearl Phenyl-600M | 40-90 | 750 | 45-55 | 3 |
Toyopearl Phenyl-650S | 20-50 | 1000 | 30-50 | 3 |
Toyopearl Phenyl-650M | 40-90 | 1000 | 30-50 | 3 |
Toyopearl Phenyl-650C | 50-150 | 1000 | 30-50 | 3 |
Toyopearl Butyl-650S | 20-50 | 1000 | 30-50 | 3 |
Toyopearl Butyl-650M | 40-90 | 1000 | 30-50 | 3 |
Toyopearl Butyl-650C | 50-150 | 1000 | 30-50 | 3 |
Toyopearl Butyl-600M | 40-90 | 750 | 40-60(g/L γ-球蛋白) | 3 |
Toyopearl SuperButyl-550C | 50-150 | 500 | 52-70 | 3 |
Toyopearl Hexyl-650C | 50-150 | 1000 | 30-50 | 3 |
產(chǎn)品 | 貨號 | 包裝(ml) |
Toyopearl Ether-650S | 043151 | 25 |
016172 | 100 | |
016174 | 1000 | |
Toyopearl Ether-650M | 019805 | 25 |
016173 | 100 | |
016175 | 1000 | |
Toyopearl PPG-600M | 021301 | 25 |
021302 | 100 | |
021303 | 1000 | |
Toyopearl Phenyl-600M | 021887 | 25 |
021888 | 100 | |
021889 | 1000 | |
Toyopearl Phenyl-650S | 043152 | 25 |
014477 | 100 | |
014784 | 1000 | |
Toyopearl Phenyl-650M | 019818 | 25 |
014478 | 100 | |
014783 | 1000 | |
Toyopearl Phenyl-650C | 043126 | 25 |
014479 | 100 | |
014785 | 1000 | |
Toyopearl Butyl-650S | 043153 | 25 |
007476 | 100 | |
014701 | 1000 | |
Toyopearl Butyl-650M | 019802 | 25 |
007477 | 100 | |
014702 | 1000 | |
Toyopearl Butyl-650C | 043127 | 25 |
007478 | 100 | |
014703 | 1000 | |
Toyopearl Butyl-600M | 021448 | 25 |
021449 | 100 | |
021450 | 1000 | |
Toyopearl SuperButyl-550C | 019955 | 25 |
019956 | 100 | |
019957 | 1000 | |
Toyopearl Hexyl-650C | 044465 | 25 |
019026 | 100 | |
019027 | 1000 |