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方法信息
純化步驟	Protein A?- Desalting
第一步?– Protein A
Buffer A –?平衡液	25?mM?PB, 150mM NaCl, pH 7.4
Buffer B –?洗脫液	100mM citrate, pH 3.5
Buffer C –?NaOH	0.1?M?NaOH
樣品上清液	10?mL CHO單抗上清液，濃度1.0 mg/mL
第二步–?Desalting
Buffer D –?平衡液	25?mM?PB, pH 7.4

結(jié)果匯總
產(chǎn)品濃度	3.7 mg/mL
產(chǎn)量	9.92 mg
單體含量	96.5%
聚集體含量	3.2%

方法信息
純化步驟	IMAC - Desalting
第一步?–?IMAC
Buffer A –?平衡液	25?mM?PB, 0.5?M NaCl, 10?mM imidazole, pH 7.5
Buffer B –?洗脫液	25?mM?PB, 0.5?M NaCl, 0.5?M imidazole, pH 7.5
Buffer C –?NaOH	0.1?M?NaOH
樣品上清液	5?mL E. coli BL21(DE3)細(xì)胞裂解液，過量表達(dá)20 kDa?His6-UCB9 (濃度0.5mg/mL)
第二步–?Desalting
Buffer D –?平衡液	1x PBS, pH 7.4

結(jié)果匯總
產(chǎn)品濃度	1.1?mg/mL
產(chǎn)量	2.3?mg
單體含量	98.1%
聚集體含量	1.9%

方法信息
純化步驟	Protein A?-?CIEX?- Desalting
第一步?– Protein A
Buffer A –?平衡液	25?mM?PB, 150mM NaCl, pH 7.0
Buffer B –?洗脫液	100mM citrate, pH 3.5
Buffer C –?NaOH	0.1?M?NaOH
樣品上清液	10?mL CHO單抗上清液，濃度1.0 mg/mL
第二步?–?CIEX
Buffer?D–?平衡液	25?mM?PB, pH?6.0
Buffer?E?–?洗脫液	25?mM?PB,?0.5 M NaCl,?pH?6.0
Buffer C –?NaOH	0.1?M?NaOH
第三步?–?Desalting
Buffer?F?–?平衡液	25?mM?PB, pH 7.0

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第一百一十期 Discovery整合化層析應(yīng)用案例分享

結(jié)果匯總
產(chǎn)品濃度	0.91?mg/mL
產(chǎn)量	6.7?mg
單體含量	99.5%
聚集體含量	0.5%