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抗體純化用親和層析填料
抗體是一種結(jié)構(gòu)復(fù)雜的糖蛋白。即使是天然抗體,其結(jié)構(gòu)也是各不相同??贵w類(lèi)藥物在其生產(chǎn)工藝(培養(yǎng)、分離純化)或貯存過(guò)程中容易導(dǎo)致產(chǎn)品的不均一性,所以在藥物研發(fā)以及純化、生產(chǎn)過(guò)程中,對(duì)抗體藥物的定量和定性的分析時(shí)非常重要的。
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??????? Protein A是一種金黃色葡萄球菌細(xì)胞壁蛋白質(zhì),能特異性地與人和哺乳動(dòng)物抗體(主要是IgG)的Fc區(qū)結(jié)合。因而,將Protein A 與層析介質(zhì)以一定的方式結(jié)合,可制備用于抗體純化的親和填料。
????? ?
早期的Protein A柱結(jié)合的都是天然Protein A。天然Protein A5個(gè)IgG結(jié)合域和其它未知功能的非Fc結(jié)合域組成,分子量約42KDa,結(jié)構(gòu)如下圖所示。這種柱子對(duì)IgG的親和能力很強(qiáng),可以吸附大量的lgG。但同時(shí),天然Protein A的其他非結(jié)合域會(huì)和非目標(biāo)蛋白結(jié)合,這樣被洗脫下來(lái)的蛋白質(zhì)純度不夠,會(huì)影響到后續(xù)的試驗(yàn)。


產(chǎn)品特點(diǎn)
?

產(chǎn)品

目標(biāo)配體

粒徑(μm

每毫升結(jié)合量

應(yīng)用

pH穩(wěn)定性

工作(清洗)

最高流速

cm/h

rProtein A

Sepharose FF

6mg重組Protein A

60-165

50mg人類(lèi)IgG

30mg小鼠IgG

是實(shí)驗(yàn)室和工業(yè)規(guī)模從細(xì)胞培養(yǎng)純化和回收抗體的理想選擇

3-102-11

300

nProtein A

Sepharose 4FF

6mg Protein A

45-165

35 mg人類(lèi)IgG

抗體純化,無(wú)任何動(dòng)物衍生組分

3-92-10

300

rmpProtein A

Sepharose 4FF

6mg重組Protein A

60-165

35 mg人類(lèi)IgG

低脫落、一步高純度純化單抗和多抗

3-102-11

300

Protein A

Sepharose CL-4B

2-3 mg Protein A

45-165

16-25mg人類(lèi)IgG

2mg小鼠IgG

純化體液或細(xì)胞培養(yǎng)液中的免疫球蛋白

3-92-10

150

Protein G

Sepharose 4FF

2 mg

蛋白G

45-165

24mg人類(lèi)IgG

23mgIgG

17mg天竺鼠IgG19mg山羊IgG;

7mg大鼠IgG;10mg小鼠IgG

3-92-9

400

GammaBind G

Sepharose

-

45-165

17mgIgG

結(jié)合來(lái)自人、小鼠、大鼠的所有IgG亞基,結(jié)合來(lái)自豚鼠、山羊、牛、綿羊和馬的所有IgG

3-92-9

130

-

GammaBind Plus

Sepharose

-

45-165

20mgIgG

增加大鼠和小鼠單抗的載量(還有人、牛、綿羊、馬、兔和山羊)

3-92-9

130

-

KappaSelect

11 mg Fab/ml

75

-

主要特異性吸附抗體的Fab,或純化Fab融合蛋白

3-10

600

IgSelect

S.Cerevisiae產(chǎn)生的重組的14kD蛋白

75

17mg/min

(在2.4min保留時(shí)間內(nèi))

特異純化人類(lèi)IgG,能結(jié)合人類(lèi)IgG的所有亞型,包括IgG3

2-11(長(zhǎng)期)

1-13(短期)

600

Capto L

10mg/ml

85

25mg人類(lèi) Fab

純化廣泛的抗體片段,例如Fabs,單鏈可變區(qū)片段(scFv)和區(qū)域抗體(Dabs),包括kappa的輕鏈

2-10

500cm/20cm柱床


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